DIAGNÓSTICO GENÉTICO DAS MALFORMAÇÕES DO DESENVOLVIMENTO CORTICAL

RESUMO

INTRODUÇÃO: O desenvolvimento do córtex cerebral humano ocorre por mecanismos complexos e que abrangem três estágios principais: proliferação, migração e organização celular. Uma alteração ou defasagem em qualquer um dos estágios pode levar a uma Malformação do Desenvolvimento Cortical (MDC). Pacientes com MDC tem quadro clínico variável, mas é frequente a relação com deficiência intelectual e epilepsia. Com o surgimento de técnicas moleculares de alto desempenho, principalmente o array-cromossômico (AC) e o sequenciamento completo do exoma humano (SCE) é hoje possível identificar variantes em genes candidatos para diferentes doenças monogênicas realizando assim o diagnóstico genético desses pacientes, incluindo as MDC.

OBJETIVOS: Pesquisar causas monogênicas para as MDC em uma grande coorte de pacientes previamente investigados do ponto de vista clínico e de neuroimagem.

MÉTODOS: Nossa casuística é composta por um total de 100 pacientes que apresentam diferentes formas de MDC. Amostras de DNA genômico extraído dos pacientes já forma submetidas ao AC e ao SCE e todos os dados foram gerados. Neste momento, realizamos as análises com o uso de algoritmos de bioinformática para a identificação de variantes. As variantes identificadas estão sendo classificadas com relação a possível patogenicidade de acordo com os critérios propostos pelo American College of Medical Genetics and Genomics (ACMG).

RESULTADOS: Até o momento, já analisamos os dados do SCE de 5 pacientes, destes três são do sexo feminino (paciente número 1, 2 e 3) e dois são do sexo masculino (paciente 4 e 5). Encontramos a variante do tipo missense c.743C>T (p.Ala248Val) em heterozigose no gene TUBB2B nas pacientes 1 e 3.

CONCLUSÃO: Essa variante é classificada como de significado incerto (VUS) segundo os critérios ACMG. A paciente 1 apresenta uma polimicrogiria perisylviana bilateral com exame neurológico normal. A paciente 3 apresenta uma MDC complexa com lissencefalia, paquigiria e heeterotopia subcortical em banda. Na avaliação clínica ela apresentava retardo do desenvolvimento neuropsicomotor e crises epilépticas que se iniciaram aos 7 anos de idade. O gene TUBB2B é o responsável por codificar uma das duas subunidades do heterodímero da tubulina, à beta-tubulina classe IIb, que por sua vez compõem os feixes de microtúbulos. A associação entre os genes TUBA1A, TUBG1, TUBA8, TUBB3, TUBBE e TUBB2B e as MCD já foi estabelecida na literatura. Assim, essa mesma variante c.743C>T (p.Ala248Val) em heterozigose foi relatada em dois pacientes que apresentavam polimicrogiria perisylviana, atraso no desenvolvimento e crises epilépticas focais noturnas. No entanto, tal variante possui uma frequência alta em alguns grupos populacionais, tornando o seu potencial patogênico menos provável. Dessa forma não está ainda determinado se a alteração encontrada neste trabalho e já relatada como associada as MDCs é o fator etiológico em nossos pacientes. Estudos adicionais serão realizados pelo nosso grupo para tentar esclarecer esse tópico ainda controverso no contexto do diagnóstico genético das MDC.

BIBLIOGRAFIA: [1] Amrom D, Tanyalçin I, Verhelst H, Deconinck N, Brouhard GJ, Décarie JC, Vanderhasselt T, Das S, Hamdan FF, Lissens W, Michaud JL, Jansen AC. Polymicrogyria with dysmorphic basal ganglia? Think tubulin! Clin Genet. 2014 Feb;85(2):178-83. doi: 10.1111/cge.12141. Epub 2013 Apr 24. PMID: 23495813. [2] Guerrini R, Mei D, Cordelli DM, Pucatti D, Franzoni E, Parrini E. Symmetric polymicrogyria and pachygyria associated with TUBB2B gene mutations. Eur J Hum Genet. 2012 Sep;20(9):995-8. doi: 10.1038/ejhg.2012.21. Epub 2012 Feb 15. PMID: 22333901; PMCID: PMC3421113. [3] Guerrini R, Dobyns WB. Malformations of cortical development: clinical features and genetic causes. Lancet Neurol. 2014 Jul;13(7):710-26. doi: 10.1016/S1474-4422(14)70040-7. Epub 2014 Jun 2. PMID: 24932993; PMCID: PMC5548104. [4] Parrini E, Conti V, Dobyns WB, Guerrini R. Genetic Basis of Brain Malformations. Mol Syndromol. 2016 Sep;7(4):220-233. doi: 10.1159/000448639. Epub 2016 Aug 27. PMID: 27781032; PMCID: PMC5073505. [5] Wang H, Li S, Li S, Jiang N, Guo J, Zhang W, Zhong M, Xie J. De Novo Mutated TUBB2B Associated Pachygyria Diagnosed by Medical Exome Sequencing and Long-Range PCR. Fetal Pediatr Pathol. 2019 Feb;38(1):63-71. doi: 10.1080/15513815.2018.1538273. Epub 2018 Dec 26. PMID: 30585108.

PALAVRA-CHAVE: Malformação do desenvolvimento cortical; Genética molecular; Neurogenética; Array-cromossômico; Sequenciamento de exoma humano.