MODELO MATEMÁTICO UTILIZANDO VARIÁVEIS TRANSCRICIONAIS E CLINICAS PARA PROGNÓSTICO DE RECIDIVA NO PÓS-OPERATÓRIO DA DOENÇA DE CROHN

RESUMO

INTRODUÇÃO: A DC é caracterizada por uma inflamação granulomatosa transmural crônica, apresentando lesões que podem acometer todo trato gastrointestinal. É observado um aumento macroscópico do TAM característico próximo à área intestinal afetada. A modulação de diversos transcritos neste tecido foi reportada por nosso grupo de pesquisa, sendo identificados dois miRNAs. Estudos apontam a ação dos miRNAs como indicadores de suscetibilidade, atividade, complicações e progressão de diversas doenças como câncer e doenças inflamatórias intestinais (DII).

OBJETIVOS: Este estudo objetivou validar biologicamente os níveis transcricionais de miRNAs e seus genes alvos no TAM de pacientes com DC ativa comparando com um grupo controle. E correlacioná-los com dados clínicos e epidemiológicos em busca de modelos prognósticos de recidiva da doença.

MÉTODOS: Foram coletadas biópsias do TAM de peças cirúrgicas de 25 pacientes com DC. Já para o grupo CTR foram coletadas biopsias do TAM próximo ao íleo distal de 15 pacientes operados por outras doenças que não DII. Os pacientes fazem parte do Ambulatório de DII “Prof. Dr. Juvenal Ricardo Navarro Góes”, localizado no Gastrocentro da Universidade Estadual de Campinas (Unicamp). Obteve-se os dados clínicos e epidemiológicos dos pacientes e realizou-se a validação biológica dos miRNAs e seus genes alvos de interesse por RT-qPCR. Foram realizados teste two-way ANOVA e não paramétrico de Mann-Whitney com p-valor<0,05. A correlação entre os transcritos e as características clínicas foi obtida através de regressão linear múltipla (RLM). Os MM construídos passaram por filtros estatísticos para garantir robustez e confiabilidade: p-valor de todas as variáveis<0,05, R-quadrado ajustado (R^2)>0,99 e potencial de acerto≥60%. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Unicamp (CAAE:78145517.0.0000.5404).

RESULTADOS: A análise transcricional evidenciou níveis aumentados dos miR-650 e miR-29c (p<0,0001 e p=0,0032, respectivamente) no TAM da DC em comparação ao grupo CTR. Os genes alvos desses miRNAs apresentaram-se regulados negativamente na DC (GFPT2, p=0,012; ALDH4A1, p=0,0035; E2F1, p=0,007; HIF3A, p=0,0029; CIDEC, p=0,001; PDK4, p=0,0054), como esperado. A RLM gerou um total de 32.767 modelos, no entanto, a aplicação dos filtros estatísticos selecionou apenas dois MM com melhor força estatística para prever recidiva. A partir da aplicação do teste desempenho foi identificado um modelo com 100% de precisão em prever o tempo para a recidiva no pós-operatório dos pacientes com DC, além de determinar os pacientes com menor risco de recidiva precoce após a cirurgia. Esse modelo utiliza como variáveis de entrada o índice de atividade da doença de Crohn, peso corporal, índice de massa corpórea, níveis transcricionais do miR-650 e -29c e de seus genes alvos GFPT2, E2F1, HIF3A, CIDEC. Além das variáveis fixas, fazem parte do modelo: tempo em semanas de pós-operatório em que a terapia com imunossupressor foi introduzida, bem como com tempo da reintrodução do agente biológico. O software desenvolvido nessa pesquisa foi registrado sob o número BR512023000506-1 no INPI (Instituto Nacional de Propriedade Industrial) pela Agência de Inovação (INOVA/Unicamp).

CONCLUSÃO: A partir da avalição dos transcritos modulados no TAM na DC, juntamente com os dados clínicos, desenvolvemos um MM que pode prever em quantos meses após a cirurgia um paciente poderá apresentar recidiva. A utilização desse modelo pode guiar o manejo clínico dos pacientes com DC após a ressecção cirúrgica. Caso o resultado do MM apresente uma recidiva precoce, os valores de introdução de medicamentos imunobiológicos e imunossupressores podem ser melhor manejados. Embora este modelo ainda precise ser testado em outros centros e em maior número de pacientes, esses achados podem constituir uma ferramenta para orientar o manejo clínico pós-operatório, mapeando os pacientes de maior risco.

BIBLIOGRAFIA: 1. Silva FAR da, Pascoal LB, Dotti I, et al. Whole transcriptional analysis identifies markers of B, T and plasma cell signaling pathways in the mesenteric adipose tissue associated with Crohn’s disease. J Transl Med 2020;18. 2. Coffey JC, O’Leary DP. The mesentery: structure, function, and role in disease. Lancet Gastroenterol Hepatol 2016;1. 3. Dias CB, Milanski M, Portovedo M, et al. Defective apoptosis in intestinal and mesenteric adipose tissue of Crohn’s disease patients. PLoS One 2014;9. 4. Coope A, Pascoal LB, Silva FAR da, et al. Transcriptional and molecular pathways activated in mesenteric adipose tissue and intestinal mucosa of Crohn’s disease patients. Int J Inflam 2017;2017.

PALAVRA-CHAVE: doença de Crohn; mesentério; microRNA; análise transcricional; biomarcador